維生素B12 維生素類藥

C₆₃H₈₈CoN₁₄O₁₄P 1355.38

本品為Coα-［α-（5，6-二甲基苯並咪唑基）］-Coβ氰鈷酰胺。按干燥品計算，含C₆₃H₈₈CoN₁₄O₁₄P不得少于96.0%。

【性狀】

本品為深紅色結晶或結晶性粉末；無臭；引濕性強。

本品在水或乙醇中略溶，在丙酮、三氯甲烷或乙醚中不溶。

【鑑別】

（1）取本品約1mg，加硫酸氫鉀約50mg，置坩堝中，灼燒至熔融，放冷，加水3ml，煮沸使溶解，加酚酞指示液1滴，滴加氫氧化鈉試液至顯淡紅色后，加醋酸鈉0.5g、稀醋酸0.5ml與0.2%1-亞硝基-2-萘酚-3，6-二磺酸鈉溶液0.5ml，即顯紅色或橙紅色；加鹽酸0.5ml，煮沸1分鍾，顏色不消失。

（2）取含量測定項下的供試品溶液，照紫外-可見分光光度法（通則0401）測定，在278nm、361nm與550nm的波長處有最大吸收。361nm波長處的吸光度與278nm波長處的吸光度的比值應為1.70～1.88.361nm波長處的吸光度與550nm波長處的吸光度的比值應為3.15～3.45。

（3）本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜（光譜集449圖）一致。

【檢查】

溶液的澄清度　取本品20mg，加水10ml溶解后，溶液應澄清。

有關物質　照高效液相色譜法（通則0512）測定。避光操作，臨用新制。

供試品溶液　取本品適量，加流動相溶解並稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液。

對照溶液　精密量取供試品溶液1ml，置100ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。

系統適用性溶液　取維生素B₁₂約25mg，置25ml量瓶中，加水10ml使溶解，加0.1%氯胺T溶液5ml與0.05mol/L鹽酸溶液0.5ml，用水稀釋至刻度，搖勻，放置5分鍾，精密量取1ml，置10ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。

靈敏度溶液　精密量取對照溶液1ml，置10ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。

色譜條件　用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.028mol/L磷酸氫二鈉溶液（用磷酸調節pH值至3.5）（26：74）為流動相；檢測波長為361nm；進樣體積10μl。

系統適用性要求　系統適用性溶液色譜圖中，應出現維生素B₁₂峰與一個降解產物峰（相對保留時間約為1.4），二峰之間的分離度應大于2.5。靈敏度溶液色譜圖中，主峰的信噪比應大于3。

測定法　精密量取供試品溶液與對照溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的3倍。

限度　供試品溶液色譜圖中如有雜質峰，各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的2倍（2.0%）。

假維生素B₁₂　取本品1.0mg，置分液漏鬥中，加水20ml使溶解，加甲酚-四氯化碳（1：1）5ml，充分振搖1分鍾；分取下層溶液，置另一分液漏鬥中，加硫酸溶液（1→7）5ml，充分振搖，上層溶液應無色；如顯色，與同體積的對照液［取高錳酸鉀滴定液（0.02mol/L）0.15ml，加水至250ml］比較，不得更深。

干燥失重　取本品約50mg，在105℃干燥至恒重，減失重量不得過12.0%（通則0831）。

【含量測定】

照紫外-可見分光光度法（通則0401）測定。避光操作。

供試品溶液　取本品適量，精密稱定，加水溶解並定量稀釋制成每1ml中約含25μg的溶液。

測定法　取供試品溶液，在361nm的波長處測定吸光度，按C₆₃H₈₈CoN₁₄O₁₄P的吸收系數（）為207計算。

【類別】

維生素類藥。

【貯藏】

遮光，密封保存。

【制劑】

（1）維生素B₁₂注射液　（2）維生素B₁₂滴眼液