甲氨蝶呤 抗腫瘤藥

C₂₀H₂₂N₈O₅ 454.45

本品為4-氨基-10-甲基葉酸及結構相似物的混合物，主要成分為L-（+）-N-［4-［［（2，4-二氨基-6-蝶啶基）甲基］甲氨基］苯甲酰基］谷氨酸。按無水物計算，含C₂₀H₂₂N₈O₅應為98.0%～102.0%。

【性狀】

本品為橙黃色結晶性粉末。

本品在水、乙醇、三氯甲烷或乙醚中幾乎不溶；在稀鹼溶液中易溶，在稀鹽酸中溶解。

比旋度　取本品，精密稱定，加0.05mol/L碳酸鈉溶液溶解並定量稀釋制成每1ml中約含10mg的溶液，用2dm的測定管依法測定（通則0621），比旋度為+19°至+24°。

【鑑別】

（1）取本品約5mg，加0.5%碳酸銨溶液1ml溶解后，用鹽酸溶液（9→1000）稀釋制成每1ml中含10μg的溶液，照紫外-可見分光光度法（通則0401）測定，在244nm與306nm的波長處有最大吸收，在234nm與262nm的波長處有最小吸收。

（2）本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜（光譜集108圖）一致。

【檢查】

（R）-甲氨蝶呤　照高效液相色譜法（通則0512）測定。

供試品溶液　取本品，加流動相溶解並稀釋制成每1ml中約含0.2mg的溶液。

對照溶液　精密量取供試品溶液1ml，置100ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。

系統適用性溶液　取消旋甲氨蝶呤，加流動相溶解並稀釋制成每1ml中約含40μg的溶液。

色譜條件　用牛血清白蛋白鍵合硅膠為填充劑；以正丙醇-磷酸鹽緩衝液（pH 6.9）（取0.71%無水磷酸氫二鈉溶液500ml，加0.69%磷酸二氫鈉溶液600ml，搖勻，用2mol/L氫氧化鈉溶液調節pH值至6.9）（8：92）為流動相；檢測波長為302nm；進樣體積20μl。

系統適用性要求　系統適用性溶液色譜圖中，出峰順序依次為（S）-甲氨蝶呤峰與（R）-甲氨蝶呤峰，其分離度應大于3.0。

測定法　精密量取供試品溶液與對照溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

限度　供試品溶液色譜圖中如有（R）-甲氨蝶呤峰，其峰面積不得大于對照溶液主峰面積的3倍（3.0%）。

有關物質　照高效液相色譜法（通則0512）測定。

供試品溶液　取本品，加流動相溶解並稀釋制成每1ml中含1mg的溶液。

對照溶液　精密量取供試品溶液1ml，置200ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。

系統適用性溶液　分別取甲氨蝶呤與葉酸，用流動相溶解並稀釋制成每1ml中各約含0.1mg的混合溶液。

色譜條件　用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-7.0%枸櫞酸溶液-2.0%無水磷酸氫二鈉溶液（8.5：10：80）（用7.0%枸櫞酸溶液或2.0%無水磷酸氫二鈉溶液調節pH值至6.0）為流動相；檢測波長為302nm；系統適用性溶液進樣體積10μl，其他溶液進樣體積50μl。

系統適用性要求　系統適用性溶液色譜圖中，理論板數按甲氨蝶呤峰計算不低于1000，甲氨蝶呤峰與葉酸峰之間的分離度應大于8.0。

測定法　精密量取供試品溶液與對照溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的4倍。

限度　供試品溶液色譜圖中如有雜質峰，單個雜質的峰面積不得大于對照溶液的主峰面積（0.5%），各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的4倍（2.0%）。

水分　取本品，照水分測定法（通則0832第一法1）測定，含水分不得過12.0%。

熾灼殘渣　取本品1.0g，依法檢查（通則0841），遺留殘渣不得過0.1%。

重金屬　取本品0.50g，加25%硫酸鎂的硫酸溶液（取硫酸鎂25g，加1mol/L硫酸溶液100ml使溶解）4ml，搖勻，置水浴上蒸發至干，于800℃緩緩熾灼至完全炭化，熾灼時間不超過2小時，放冷，依法檢查（通則0821第二法），含重金屬不得過百萬分之五十。

【含量測定】

照高效液相色譜法（通則0512）測定。

供試品溶液　取本品，精密稱定，加流動相溶解並定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液。

對照品溶液　取甲氨蝶呤對照品適量，精密稱定，加流動相溶解並定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液。

色譜條件　見有關物質項下。進樣體積10μl。

系統適用性溶液與系統適用性要求　見有關物質項下。

測定法　精密量取供試品溶液與對照品溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算。

【類別】

抗腫瘤藥。

【貯藏】

遮光，密封，在陰涼處保存。

【制劑】

（1）甲氨蝶呤片　（2）注射用甲氨蝶呤

附：

（R）-甲氨蝶呤

C₂₀H₂₂N₈O₅ 454.44

（R）-2-［4-［N-［（2，4-二氨基-6-蝶啶基）甲基］甲氨基］苯甲酰氨基］戊二酸