兩性黴素B 抗真菌藥

C₄₇H₇₃NO₁₇ 924.09

本品為［1R-（1R^∗，3S^∗，5R^∗，6R^∗，9R^∗，11R^∗，15S^∗，16R^∗，17R^∗，18S^∗，19E，21E，23E，25E，27E，29E，31E，33R^∗，35S^∗，36R^∗，37S^∗）］-33-［（3-氨基-3，6-二脱氧-β-D-吡喃甘露糖基）氧］-1，3，5，6，9，11，17，37-八羥基-15，16，18-三甲基-13-氧代-14，39-二氧雙環［33.3.1］三十九烷-19，21，23，25，27，29，31-七烯-36-羧酸。按干燥品計算，每1mg的效價不得少于850兩性黴素B單位。

【性狀】

本品為黃色至橙黃色粉末，無臭或幾乎無臭；有引濕性，在日光下易破壞失效。

本品在二甲基亞碸中溶解，在N，N-二甲基甲酰胺中微溶，在甲醇中極微溶解，在水、無水乙醇或乙醚中不溶。

【鑑別】

（1）在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致。

（2）本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜（光譜集176圖）一致。

【檢查】

酸度　取本品3%的混懸液，依法測定（通則0631），pH值應為4.0～6.0。

有關物質　照高效液相色譜法（通則0512）測定。臨用新制。

溶劑　N，N-二甲基甲酰胺-水（1：1）。

供試品溶液　取本品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加N，N-二甲基甲酰胺溶解並定量稀釋制成每1ml中約含0.8mg的溶液，精密量取適量，用溶劑定量稀釋制成每1ml中約含80μg的溶液。

對照品溶液　取兩性黴素B對照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加N，N-二甲基甲酰胺溶解並定量稀釋制成每1ml中約含0.8mg的溶液，精密量取適量，用溶劑定量稀釋制成每1ml中約含0.8μg的溶液。

系統適用性溶液　取兩性黴素B約8mg，置50ml棕色量瓶中，加N，N-二甲基甲酰胺5ml使溶解，用甲醇稀釋至刻度，加鹽酸0.1ml，搖勻，放置1小時，取5ml，置10ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。

靈敏度溶液　精密量取對照品溶液適量，用溶劑定量稀釋制成每1ml中約含0.08μg的溶液。

色譜條件　用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（4.6mm×250mm，5μm或效能相當的色譜柱）；以乙腈-磷酸溶液（pH 1.00±0.05）（300：700）為流動相A，以乙腈-磷酸溶液（pH 1.00±0.05）（500：500）為流動相B，按下表進行線性梯度洗脱；流速為每分鍾0.8ml；柱温為25℃；檢測波長為303nm和383nm；進樣體積100μl。

系統適用性要求　系統適用性溶液色譜圖（383nm）中，必要時調整流動相的比例使兩性黴素B的保留時間在25～30分鍾之間，雜質C峰與雜質B峰間的分離度應符合要求。靈敏度溶液色譜圖（383nm）中，主成分色譜峰高的信噪比應大于10。

測定法　精密量取供試品溶液與對照品溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

限度　供試品溶液色譜圖（303nm）中如有雜質峰，雜質A（相對保留時間約為0.75）峰面積不得大于兩性黴素B峰面積的0.5倍（2.0%）（供注射用），雜質A峰面積不得大于兩性黴素B峰面積的1.25倍（5.0%）（供非注射用），其他單個雜質峰面積不得大于兩性黴素B峰面積的0.25倍（1.0%），小于兩性黴素B峰面積的0.025倍的峰忽略不計（0.1%）；供試品溶液色譜圖（383nm）中如有雜質峰，按外標法以對照品溶液主峰面積計算，雜質B與雜質D之和不得過4.0%，其他單個雜質峰不得過2.0%，小于靈敏度溶液主峰面積的峰忽略不計。303nm處與383nm處檢測的雜質總量不得過15.0%。

干燥失重　取本品，以五氧化二磷為干燥劑，在60℃減壓干燥至恒重，減失重量不得過5.0%（通則0831）。

【含量測定】

照高效液相色譜法（通則0512）測定。臨用新制。

溶劑　見有關物質項下。

供試品溶液　取本品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加N，N-二甲基甲酰胺溶解並定量稀釋制成每1ml中約含0.8mg的溶液，精密量取1ml，置10ml棕色量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，搖勻。

對照品溶液　取兩性黴素B對照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加N，N-二甲基甲酰胺溶解並定量稀釋制成每1ml中約含0.8mg的溶液，精密量取1ml，置10ml棕色量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，搖勻。

色譜條件　用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-磷酸溶液（pH 1.00±0.05）（370：630）為流動相；流速為每分鍾0.8ml；柱温為25℃；檢測波長為383nm；進樣體積10μl。

系統適用性要求　對照品溶液色譜圖中，兩性黴素B峰與相鄰雜質峰間的分離度應符合要求。

測定法　精密量取供試品溶液與對照品溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算。每1mg的C₄₇H₇₃NO₁₇相當于1049兩性黴素B單位。

【類別】

抗真菌藥。

【貯藏】

遮光，嚴封，冷藏。

【制劑】

注射用兩性黴素B

附：

1. 兩性黴素B有關物質分析典型色譜圖

填料品牌：XBridge shield RP18、XAqua C18等，可分離雜質B和雜質D。

填料品牌：CAPCELL PAK C18 MGⅡ、Ultimate LPC18、Inspire C18等，雜質B和雜質D同時洗脱。

2. 雜質結構

雜質A（兩性黴素A）

C₄₇H₇₅NO₁₇ 926.11

雜質B

C₄₈H₇₅NO₁₇ 938.12

1R-氧-甲基-兩性黴素B

雜質C

C₄₉H₇₇NO₁₇ 952.15

1-氧-乙基-兩性黴素B

雜質D

C₄₈H₇₅NO₁₇ 938.12

1S-氧-甲基-兩性黴素B

雜質E

C₄₈H₇₃NO₁₈ 952.10

33-（3-甲酰基）-兩性黴素B